INFRAESTRUCTURAS
El grupo cuenta con dos sedes de trabajo. Una granja experimental y un laboratorio de asociados a la Facultad de Veterinaria en Zaragoza, y un laboratorio de Biotecnología en la Escuela Politécnica Superior de Huesca.
Laboratorio de Biotecnología
Los investigadores del IUCA del grupo BIOFITER desarrollan su labor en el Laboratorio de Biotecnología de la Escuela Politécnica Superior de Huesca. En estas instalaciones llevan a cabo investigación fundamentalmente aplicada en el ámbito de la producción agraria, tanto en el campo de la mejora genética vegetal y animal como en proyectos relacionados con la reproducción animal.
Esta actividad investigadora se lleva a cabo en colaboración con grupos pertenecientes a otras instituciones, como la Universidad de Valencia, por lo que las tareas se desarrollan también en instalaciones de dicha universidad y contando con el soporte de su Servicio Central de Apoyo a la Investigación Experimental (SCIE) en trabajos de secuenciación y genotipado, así como en análisis químico mediante espectrometría de masas.
En el laboratorio de la Escuela Politécnica, en el ámbito de la Biotecnología Vegetal se realizan procesos de micropropagación de plantas y de análisis genético mediante marcadores de ADN amplificados por PCR, así como estudios de expresión génica mediante amplificación de ADNc por PCR a tiempo real. En lo referente a la Biotecnología Animal, se realizan y diseñan técnicas de análisis de la calidad seminal en diferentes especies, conservación del semen en refrigeración y congelación (bancos de semen), análisis microscópico de muestras celulares y tisulares, análisis hormonal y de proteínas mediante ELISA, análisis molecular mediante PCR y qPCR, inseminación artificial en rumiantes y abejas y caracterización morfométrica de las variantes genéticas en abejas, entre otras. Se dispone para ello de equipos específicos que se detallan a continuación.
EQUIPAMIENTO
El laboratorio de Biotecnología
dispone de un amplio equipamiento que permite el desarrollo de múltiples investigaciones
En el laboratorio de la Escuela Politécnica, en el ámbito de la Biotecnología Vegetal
se realizan procesos de micropropagación de plantas y de análisis genético mediante marcadores de ADN amplificados por PCR, así como estudios de expresión génica mediante amplificación de ADNc por PCR a tiempo real
- Sala blanca con cabina de flujo lamimar e incubadores, lupa triocular calefactada Leica y micromanipulador.
- Microscopio Olympus BX40 con pletina termostatizada y contraste de fases,
- Sistema para el análisis computerizado de la calidad seminal (CASA, ISAS®) y sistema OpenCASA v2.
- Microscopio de fluorescencia Olympus IX70 con contraste de fases y Hoffmann.
- Microscopio de fluorescencia Leica DM4500B con contraste de fases, e interdiferencial.
- Cámaras digitales de vídeo y fotografía con control remoto conectadas a microscopios.
- Biocongelador programable: Freeze Control, Cryologic.
- Equipos de inseminación artificial de reinas Schley y Swenty, específicos para la extracción seminal e IA en esta especie.
- Termociclador Stepone Plus para PCR a tiempo real.
- Equipos de electroforesis horizontal y sistema de captación de imágenes.
- Centrífugas y microcentrífugas.
- Liofilizadores
- Ultracongelador de -80ºC.
- Lector de ELISA
- Cabinas de flujo laminar horizontal.
- Cámaras de cultivo visitables y fitotrones.
- Autoclaves.
- Cabinas para PCR.
- Nanodrop Lite.
- Termocicladores.
Laboratorio de
Bioquímica
Parte de los investigadores del grupo BIOFITER del IUCA desarrollan su labor en el Dpto. de Bioquímica y Biología Molecular y Celular de la Facultad de Veterinaria de la Universidad de Zaragoza. En estas instalaciones se llevan a cabo proyectos de investigación, tanto básica como aplicada, en el ámbito de la reproducción animal, especialmente de la especie ovina. Así mismo, el grupo dispone de varios sementales en las instalaciones del SAE de dicha facultad, para disponer de muestras para sus experiencias. También se realizan estudios ecográficos a nivel del aparato reproductor mediante análisis de ecotextura testicular y eco-doppler.
En los laboratorios del citado departamento, se realizan numerosas técnicas de análisis de calidad seminal, tanto rutinarias o clásicas, como evaluación de la concentración, viabilidad y motilidad espermáticas, como técnicas no rutinarias que incluyen el estudio del estado de capacitación, apoptosis, fragmentación del DNA o integridad acrosomal.
Estos análisis se llevan a cabo mediante citometría de flujo y microscopía de fluorescencia. También se realizan análisis hormonales mediante ELISA, estudios de actividad enzimática mediante espectrofotometría en placa y análisis de proteínas mediante electroforesis y Western-blot.
Para la localización de determinadas proteínas en el espermatozoide o en tejidos del tracto reproductor, se llevan a cabo estudios mediante inmunofluorescencia indirecta e inmunohistoquímica.
Los estudios a nivel génico, se realizan mediante PCR y qPCR. Se dispone para ello de equipos específicos que se detallan a continuación.
EQUIPAMIENTO
El laboratorio de Bioquímica
dispone de un amplio equipamiento que permite el desarrollo de múltiples investigaciones
Se realizan estudios ecográficos a nivel del aparato deproductor mendiante análisis de ecotextura testicular y eco-droppler
En los laboratorios del citado departamento, se realizan numerosas técnicas de análisis de calidad seminal, tanto rutinarias o clásicas, como evaluación de la concentración, viabilidad y motilidad espermáticas, como técnicas no rutinarias que incluyen el estudio del estado de capacitación, apoptosis, fragmentación del DNA o integridad acrosomal.
• Citometro de flujo Beckmann Coulter FC500 para el análisis de las muestras espermáticas teñidas con diferentes fluorocromos para la evaluación de diversos parámetros de calidad seminal.
• Unidad de distribución en contracorriente con centrifugación (CCCD), para separación de subpoblaciones espermáticas
• Microscopios de fluorescencia Nikon Eclipse E400
• Microscopios de contraste de fases Nikon Eclipse 50i
• Cámaras de video conectadas a los microscopios: Proiser ISAS 782c, Basler acA1920-1550c y Hamamatshu C13440
• Cámaras fotográficas conectadas a los microscopios Nikon Digital Sight DS-5MC
• Sistema de análisis y cuantificación densitométrica de las membranas de Western-blot: Odyssey CLx near-infrared fluorescence imaging system
• Espectrofotómetros Thermo Evolution 300 y Hitachi U2800A
• Sistemas de análisis de motilidad y otras características espermáticas asistidos por ordenador (ISAS and Open-CASA)
• Estufa de CO2 wtc Binder y de CO2/O2 Sanyo para llevar a cabo las incubaciones de los espermatozoides en condiciones capacitantes
• Estufas Indelab y P-Selecta, para la realización de las técnicas de separación espermática por swim-up/dextrano
• Incubador orbital de temperatura controlada Ovan
• Agitador orbital de Labox instrument SHKP-500-001
• Sonicador Sonic Vibracell,para la lisis celular
• Osmómetro Vapro®, mod. 5520, de Wescor, para ajustar la osmolaridad de los medios.
• Ecógrafo EXAGO con sonda lineal de 7.5 MHz y software ECOTEXT software
• Biocongelador programable IMV para la congelación de las dosis seminales.
• Baño termostatizado programable Polyscience para la refrigeración de las dosis seminales.
• Sistema de electroforesis y transferencia de proteínas Trans-Blot Turbo de Bio-Rad
• Sistemas de cromatografía Biorad
• Centrífugas Eppendorff con y sin refrigeración
• Ultracentrífugas Thermofisher
Proyectos desarrollados
El grupo cuenta con financiación pública ininterrumpida durante los últimos 20 años a través de los Programas Nacionales de Investigación.
Además, a destacar la aplicación de biotecnologías reproductivas para la conservación y mejora de la abeja negra ibérica y una línea en relación al desarrollo de la Ganadería de Precisión (Precision Livestock Farming). Se cuenta con numerosos contratos de investigación con empresas del sector.
- • Efecto de hormonas del tracto reproductor femenino sobre la funcionalidad espermática.
- • Metabolismo de la melatonina en el tracto genital masculino. Implicación de esta hormona en la calidad seminal y fisiología de los espermatozoides.
- • Hacia un análisis integrado de la calidad espermática en vacuno y ovino.
- • Hacia un manejo reproductivo sostenible la presencia de machos sexualmente activos como herramienta de trabajo” (Ministerio de Economía y Competitividad).
Contacto
Pilar Santolaria Blasco
Responsable del grupo BIOFITER
Departamento de Producción animal y ciencia de los alimentos
Escuela Politécnica Superior. Universidad de Zaragoza